RESUMO
Introducción: Se estima que 1 de cada 1.000 niños presenta hipoacusia severa al nacimiento o en los primeros meses de vida y el 50 por ciento de las hipoacusias congénitas se relacionan con el gen de la conexina 26 (GJB2). En poblaciones caucásicas la variante patogénica 35delG del gen GJB2, que es la más frecuente, se encuentra en 30 por ciento de los pacientes con hipoacusia congénita no sindrómica. En Chile, la frecuencia de esta variante en escolares sordos no está descrita. Objetivos: Estimar la frecuencia de la mutación 35delG del gen GJB2 en niños con sordera congénita no sindrómica y no atribuible a causas ambientales conocidas, de colegios especiales de Santiago. Correlacionar la presencia de 35delG con los antecedentes clínicos de estos niños. Material y método: Se determinó la presencia de la mutación 35delG mediante PCR alelo específico y secuenciación automatizada en 81 escolares. Se buscó asociar la presencia de 35delG y los antecedentes clínicos de los niños mediante la prueba exacta de Fisher. Resultados: En el grupo estudiado, el 11,25 por ciento de los casos presentaron la variante 35delG, siendo ésta más frecuente en los casos en que había antecedentes familiares de sordera. En 8 casos se encontró una variante considerada no patogénica V27I. Conclusión: La frecuencia de la mutación 35delG fue inferior a lo esperado, probablemente debido al método de selección de los niños a estudiar (aquellos cuyos padres no referían causa conocida de sordera, lo cual no fue refrendado por exámenes de laboratorio que permitieran descartar enfermedades infecciosas u otras condiciones causantes de sordera).
Introduction: Congenital hearing loss occurs in 1 in 1000 live births and 50 percent of these cases are related with mutations in the connexin26 gene (GJB2). The 35delG variant is the most common of the known pathogenic alleles in Caucasian populations, reaching a frequency of 30 percent among the non syndromic congenital deaf people. The frequency of this variant has not been described in Chilean deaf children. Aim: To estimate the frequency of the 35delG GJB2 gene mutation in children with non syndromic congenital hearing loss of unknown etiology from deaf schools in Santiago, and to evaluate the association between clinical features of these children and the presence of the 35delG allele. Material and method: The presence of the 35delG mutation was studied by allele specific PCR and automatical sequencing in 81 children. The association between clinical issues and genotypes was explored by Fisher exact test. Results: We found the 35delG variant in 11,25 percent of the children, this mutation was more frequent in familial cases than sporadic cases of deafness. We also found the V27I non pathogenic variant in 8 cases. Conclusion: The frequency of the 35delG mutation was lower than the expected, probably due to the criterion used to select the school children to be studied.
Assuntos
Humanos , Criança , Conexinas/genética , Estudantes , Mutação , Surdez/genética , DNA , Chile , Frequência do Gene , Genótipo , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
Autosomal and Y chromosome short tandem repeats (STRs) and mitochondrial DNA polymorphisms are the most commonly used molecular tools for determination of kinship. Aim: To report a revision of 1,120 kinship cases (paternity and others) analyzed in our laboratory. Material and methods: Revision of all kinship cases analyzed between years 2001-2006. Autosomal and Y chromosome STRs and mitochondrial DNA polymorphisms were analyzed in DNA extracted from blood samples. Results: Paternity was excluded in 27.2 percent of cases. This figure did not change significantly along years. Most paternity exclusions were confirmed by the discordance in 5 genetic markers (30.5 percent), followed by exclusion of 4 and 6 genetic markers (20.3 and 20 percent respectively). Two studied cases were paternal and maternal exclusions, corresponding to a change of children between two families. In one case, the paternal line was assessed through Y chromosome markers, studying 16 STRs of this chromosome, positively confirming this paternal relationship. Another case was analyzed for maternal line using mitochondrial DNA analysis. In six cases, a genetic marker with a paternal-sibling mutation, was observed. The criteria for the determination of mutation was the finding of only one discordant marker between at ¡east thirteen markers analyzed in each case. Also, an increase or decrease in one unit repeated in tandem (tetranucleotide) between the alleged father and the son was also required. One subject had a double mutation. In this case, paternity was confirmed analyzing thirteen autosomic STRs and five Y-STRs. Conclusions: The authors have acquired great expertise in kinship analysis and had established criteria to solve complex kinship cases.
Assuntos
Criança , Feminino , Humanos , Masculino , Cromossomos Humanos Y/genética , Impressões Digitais de DNA/métodos , Repetições de Microssatélites/genética , Paternidade , Marcadores Genéticos/genética , Estudos RetrospectivosRESUMO
O polimorfismo de DNA é muito útil em pesquisa de paternidade. O presente trabalho descreve estudos de paternidade usando perfis de DNA obtidos com a sonda (CAC)5. Todos os indivíduos estudados estavam envolvidos em casos näo judiciais de paternidade. DNA genômico digerido com HaeIII foi colocado em gel de agarose e hibridizado no gel com a sonda (CAC)5 marcada com 32P. O número médio de bandas maiores que 4,3 kb por indivíduo foi 16,1. A proporçäo média de bandas compartilhadas entre indivíduos näo aparentados foi 0,08 e o número médio de bandas de teste foi 7,1. Isto correspondeu a uma probabilidade de exclusäo maior que 0,999999. A paternidade foi excluída em 34,5 por cento dos casos. A freqüência de mutaçäo estimada em casos näo excluídos foi 0,01143 bandas por criança. Nestes casos, a paternidade foi confirmada por uma análise locus-específica de oito locos independentes obtidos com PCR. O índice de paternidade foi computado em todos os casos näo excluídos. Pode-se concluir que este método é uma alternativa poderosa e econômica para resolver dúvidas de paternidade.